Molecular cloning and expression of collagenase-3, a novel human matrix metalloproteinase produced by breast carcinomas

Abstract

Esta publicación detalla los experimentos realizados para la clonación de un ADNc que codifica una nueva metaloproteasa de matriz extracelular a partir de una biblioteca de ADNc procedente de un carcinoma mamario. Este trabajo es de gran interés en la investigación del cáncer, ya que describe la identificación de una nueva colagenasa en los carcinomas mamarios proponiendo un posible papel en el proceso tumoral. Hay evidencia de que las metaloproteasas participan en el proceso de degradación proteolítica de los diferentes componentes de la membrana basal, favoreciendo así la invasión tumoral y las metástasis. El ADNc de la colagenasa-3 se expresó en un sistema de virus vaccinia, y la proteína recombinante fue capaz de degradar los colágenos fibrilares, lo que apoya la hipótesis de que el ADNc aislado codifica para una colagenasa auténtica. El análisis por Northern blot del ARN de tejidos normales y patológicos demostró la existencia de tres especies diferentes de ARNm en los tumores de mama, que parecen ser el resultado de la utilización de distintos sitios de poliadenilación presentes en la región 3'-no codificante del gen. Por el contrario, no se detectó ARNm de la colalagenasa-3 por Northern blot ni por PCR en otros tejidos humanos como mama normal, fibroadenomas mamarios, hígado, placenta, ovario, útero, próstata y glándula parótida. Sobre la base del aumento de la expresión de la colagenasa-3 en los carcinomas de mama y la ausencia de expresión detectable en los tejidos normales, se propone un posible papel de esta metaloproteinasa en el proceso tumoral.